等温滴定量热法(ITC,Isothermal Titration Calorimetry)通过测量结合过程释放/吸收的热量,直接得到结合的热力学参数:焓变(ΔH)、熵变(ΔS)、亲和力(KD)与化学计量比。
它能告诉你什么
- 焓驱动 vs 熵驱动:ΔH 主导通常意味着特异氢键/极性相互作用;ΔS 主导常与疏水效应、去溶剂化有关。
- 计量比:一个靶点结合几个配体。
- 无需标记/固定:在溶液中测量,接近自然状态。
对优化的意义
- 看清「为什么结合」:焓/熵拆分帮助理解相互作用本质。
- 焓优化:偏好焓驱动的优化常更可持续(特异相互作用)。
- 样品用量较大、通量较低,多用于关键化合物的机制确认。
关键要点
- ITC 给 ΔH、ΔS、KD 与计量比;
- 区分焓驱动/熵驱动,理解结合本质;
- 通量低,用于关键分子的机制确认。
延伸资源
- 对照:074《SPR 实验》(动力学视角)。