NanoBRET：细胞内靶点结合如何验证

NanoBRET 是一种在活细胞内测量化合物与靶点结合的技术，基于生物发光共振能量转移（BRET）。它能反映分子在细胞环境中是否真正结合并占据靶点。

它解决什么问题

• 体外结合 ≠ 细胞内结合：纯蛋白上结合好，细胞内可能因通透性或竞争而失效。
• 测占有度：可做竞争实验，得到细胞内的占有/亲和信息。
• 活细胞：在接近生理的环境中评估。

在流程中的位置

• 体外确认结合后，用 NanoBRET 验证「分子真的进了细胞并结合了靶点」。
• 与功能实验对照，建立「结合 → 占有 → 药效」的链条。
• 是细胞靶点结合（target engagement）的代表方法之一。

延伸资源

• 对照：078《CETSA》、079《Cellular Target Engagement》。