差示扫描荧光法（DSF）/ 热位移分析（TSA）利用一个原理：配体结合通常会让蛋白更耐热，使其熔解温度（Tm）升高。通过测量 ΔTm，可以快速判断分子是否结合靶点。
它的优势
- 高通量、低成本：用普通 qPCR 仪即可，适合大批量初筛。
- 少量蛋白：消耗小。
- 快速分类：把「可能结合」的分子先挑出来，再用更精细方法确认。
使用注意
- ΔTm ≠ 亲和力：热位移大小与 KD 不是简单线性关系。
- 假阴/假阳：有些真结合物不引起明显位移，反之亦然。
- 作为初筛，需用 SPR/ITC 等确认（见 074、075）。
关键要点
- DSF/TSA 用 ΔTm 快速判断结合；
- 高通量、低成本、省蛋白，适合初筛；
- ΔTm 不等于亲和力，需后续确认。
延伸资源
- 确认方法见 074《SPR》、075《ITC》。
- 细胞内验证见 077《NanoBRET》、078《CETSA》。